日本真人做爰免费视频120秒-少妇人妻无码专区视频-国产又色又爽又黄的免费软件-久久精品亚洲精品无码白云tv-国产精品亚洲w码日韩中文

產品分類

PRODUCT CATEGORY

新聞中心/ NEWS CENTER

我的位置:首頁  >  新聞中心  >  質粒的制備

質粒的制備

更新時間:2012-05-16      瀏覽次數:1900


 
電泳檢驗測定:質粒電泳普通有三條帶,作別為質粒的超螺旋、開環、線型三種構型

吸光值檢驗測定:認為合適而使用分光光度計檢驗測定260nm、280nm波長吸光值,若吸光值260nm/280nm的比率介于1.7-1.9之間,解釋明白質粒品質較好,1.8為*,低于1.8解釋明白有氨基酸污染,大于1.8解釋明白有RNA污染。

實驗材料:包括質粒pUC18載體的結腸桿菌菌液,克隆有稻子外源斷片的BAC的結腸桿菌菌液電熱恒溫鼓風干燥箱。

實驗原理:在pH 12.0 ~ 12.6堿性背景中,球菌的線性大分子量染色體DNA改變性別分開,而共價閉環的質粒DNA固然改變性別但仍處于拓撲攪擾狀況。將pH調至中性并有高鹽存在及低溫的條件下,大多染色體DNA、大分子量的RNA和氨基酸在去污劑SDS的效用下形成沉淀,而質粒DNA還是為可溶狀況。經過離心,可去掉除掉大多細胞碎片、染色體DNA、RNA及氨基酸,質粒DNA尚在上清中,而后用酚、氯仿抽提進一步醇化質粒DNA。

實驗步驟:

1.取包括pUC18質粒的結腸桿菌菌液于LA營養物質上真空干燥箱37℃過夜培育;

2.汲取1.5 ml菌液,12000 g離心2分鐘,使聚在一起菌體,倒掉菌液;汲取1.5 ml菌液,再次使聚在一起菌體,盡力將菌液倒整潔;

3.參加300 ml溶液 I振動打勻,從新懸浮細胞,震動混電熱鼓風干燥箱勻(注意:應*打勻沉淀或碎塊);

4.用無菌牙簽兒挑取單菌落,接種于包括Amp抗生素的LB營養物質中,37℃搖床~250 r/min過夜培育;

5.參加300 ml溶液III顛倒混勻,安放于冰上10分鐘,使雜質充分沉淀;

6.參加300 ml溶液II,輕柔顛倒混勻,安放至清脆,普通不超過5分鐘;

7.12000 g離心10分鐘;

8.汲取800 ml上清液(注意:不要汲取到漂浮的雜質)至另一Eppendorf管中,參加2/3大小的異丙醇,室溫下安放5分鐘干燥箱;

9.質粒、BAC的品質檢驗測定,于-20℃保留。

10.倒盡上清,加75酒精浸洗除鹽(安放一會兒或離心3分鐘后倒去上清);

11.12000 g 常溫離心15分鐘;

12.室溫安放或超凈臺上風干DNA;

13.加40 ml滅菌超純水或TE溶解;


 
 
 

電話:TEL

021-57431317

地址:ADDRESS

上海市奉賢區南橋鎮江海村744號(1號倉庫)

掃碼加微信

主站蜘蛛池模板: 欧美大屁股xxxxhd黑色| 国产福利一区二区三区在线视频 | 97久久精品亚洲中文字幕无码| 色婷婷国产精品秘?免| 1000部无遮挡拍拍拍免费视频观看| 亚洲伊人成无码综合影院| 玩弄人妻少妇精品视频| 国产偷抇久久精品a片69| 国产精品视频二区不卡| 久久无码专区国产精品| 久久精品国产字幕高潮| 久久国产福利国产秒拍| 国产乱子伦高清露脸对白| 乱人伦xxxx国语对白| 久久国产精品二国产精品| 日本又黄又爽gif动态图| 亚洲综合av色婷婷国产野外| 欧洲精品不卡1卡2卡三卡| 激情综合色综合啪啪五月丁香搜索| 扒开?让我???蜜桃视频| 丝袜 中出 制服 人妻 美腿| 日韩va中文字幕无码电影| 精品人妻二区中文字幕| 久久久久无码中| 最新亚洲人成网站在线观看| 国产又粗又大又黄| 日韩成av人片在线观看| 国产精品人成视频免费播放| 精品伊人久久久大香线蕉下载| 国产精品一区二区熟女不卡| 精品国产电影久久九九| 国产在线精品一区二区三区直播| 日韩精品久久久免费观看| 蜜臀av在线播放| 国产成人久久精品77777综合| 老色69久久九九精品高潮| 国产精品久久久久久爽爽爽| 亚洲精品乱码久久久久久蜜桃 | 高h纯肉无码视频在线观看| 国产超碰人人做人人爽av大片| 精品国产小视频在线观看|